1. 项目分析出具蛋白表达方案
周期
交付数据及材料
2. 表达体系系统选择（客户提供表达菌株的略过此步骤，仅提供表达质粒的可选择宿主菌）
可选表达载体
pFastBac1可选择分泌型和胞内型，在N端或C端设计标签
可选表达宿主
Spodoptera frugiperda （草地夜蛾）卵巢细胞
SF9 SF21 High5
A. 基因优化及合成
B. 亚克隆至表达载体pFasbac1
C. 制备重组的Bacmid
合成+亚克隆：2-3周
Bacmid制备：1-2周
1、酶切/测序验证报告
2、含表达质粒的DH10
3、表达质粒
D. P1代Baculovirus 制备
E. P1代转染
P1代制备: 1-2周
F. P2代Baculovirus 制备
G. P2代感染WB鉴定
P2代制备: 1-2周
4、P2代表达鉴定报告
H. Ni柱亲和纯化
I. 纯度检测
P2代制备: 1-2周
5、蛋白样品
（可提供50-500ug蛋白）
J. 放大培养（根据客户需求量）
K. Ni柱亲和纯化
L. 纯化蛋白检测
M. 蛋白分装发货
放大培养: 2-3周
表达纯化: 1-2周
6、蛋白纯度鉴定报告
7、成品蛋白
(依据表达小试结果约定）
补充说明
我们使用昆虫细胞体系获得蛋白，一般情况下，我们会添加信号肽让剪辑成熟的蛋白分泌至培养基中，但是并非所有的蛋白都可以按照预期顺利的分泌或表达。在尊重科研事实的基础之上，我们无法承诺所有的蛋白都可以成功表达或以分泌的形式表达。我们也不承诺获的蛋白具有客户预期的生理学活性。
